Assalamu'alaikum sobat BC lama tidak posting masalah Budidaya Jamur nih jadi kangen hehe,,,,Ok pada kesempatan ini saya mau berbagi tentang Cara Membuat Kultur Murni (PDA/F0) pada masa sekarang saja sob rahasia perusahaan di share wkwkwkwk,,,padahal dulu boro-boro dah transparan begining. langsung ke pokok pembahasan:
Bahan-bahan :
- 200gr Kentang harus dalam keadaan segar,tidak ada noda busuk kalo bisa cari dan seleksi jenis kentang yang kuning karena punya kelebihan terendiri menurut pengamatan saya selama ini.
- Dextrosa 7gr , Bahan ini bisa di cari/beli di apotek ataupun di toko bahan kimia (laboratorium)
- Agar-agar 7gr, sobat bisa cari agar-agar yang transparent
- Air hasil penyulingan/air kemasan bisa juga air hujan
- Kapas steril dan kertas email
Langkah pembuatan cairan PDA :
- Kupas kentang kemudian cuci dengan air bersih lalu cincang kira-kira 1cm2
- Rebus kentang yang sudah di potong dengan air sebanyak 1ltr selama -+ 15-20 mnt atau sampai air berwarna kekuningan (kentang lunak) kira-kira air menjadi 500 ml dari 1ltr tadi
- Ambil cairan hasil rebusan kedalam gelas ukur dengan takaran 450ml-500ml
- Masukan Dextrosa dan Agar-agar masing-masing 7gr seperti keterangan di atas
- Aduk sampai larut dan merata kemudian masukan cairan tadi kedalam botol (tabung reaksi tergantung keinginan) masing-masing 10ml
- Kemudian tutup botol /tabung dengan kapas dan lapisi dengan kertas email kemudian ikat dengan karet bila perlu.
- Sterilkan botol yang berisi cairan PDA tadi dalam Autoclave selama kurang lebih 30-45menit dalam suhu 121 derajat C, tekanan 1,5 - 2 atm. Pertahankan kondisi ini selama kurang lebih 45 menit.
- Biarkan mendingin hingga suhu kurang lebih 37 derajat C. Keluarkan botol-botol tadi dan letakkan dalam posisi miring/tidur agar cairan bisa melebar dengan tujuan memperbanyak area media. Jangan sampai cairan mencapai mulut botol.
Jika cairan PDA agar tadi sudah mengeras, barulah siap untuk di Inokulasikan bibit yang didapat dari jamur langsung.
Catatan : Sebelumnya botol dibersihkan dan disteril dengan merebus botol dengan air mendidih selama kurang lebih 10 menit. Memang dalam membuat bibit PDA, kebersihan, sterilisasi tempat, alat dan bahan adalah syarat utama dalam menunjang keberhasilannya.
Proses Inokulasi PDA :
Yang perlu disiapkan dalam proses ini anatara lain :
- Ruang inokulasi berupa tempat tertutup dan steril, kami membuatnya dengan kotak dari kaca ukuran 80 cm x 40 cm x 50 cm, atasnya diberi kaca. Alas bawah dilapisi dengan tripleks melamin putih agar bersih dan steril.
- Pinset berbahan stenlessteell
- Lampu bunsen (bisa juga buat dari botol ukuran mini)
- Kapas steril
- Pematik api (korek)
- Alkohol
- Gelas sterill
- Cawan petri
Langkah-langkah inokulasi :
- Semprotkan Alkohol kedalam kotak kerja supaya steril
- Kemudian Masukan semua peralatan yang sudah disediakan/diperlukan
- Masukan botol-botol PDA
- Masukan jamur yang hasil pemilihan yang kita mau buat indukan pilih yg segar jangan terlalu tua
- Nyalakan bunzen, lalu ambil pinset tadi dan panaskan ujung pinset di api bunzen hingga panas dan berwarna merah.
- Dinginkan pinset dan letakkan pada gelas yang bersih dan steril.
- Ambil jamur, sobeklah jamur menurut arah tangkainya, letak spora yang paling banyak kira-kira antara gagang dan tudungnya.
- Ambil potongan kecil dari jamur seukuran kira-kira 5 mm2 - 1 cm2 dengan menggunakan pinset. Pastikan mengambilnya menggunakan ujung pinset.
- Buka tutup kapas (semua proses harus dekat api bunzen), lalu masukkan eksplan (irisan) jamur tadi ke dalam botol PDA lalu segera tutup dengan kapas dan dilapisi koran, lalu ikat dengan karet gelang.
Nah kalo sudah simpan hasil pekerjaan sobat pada suhu yang lumayan tinggi 26-28 harus tempat yang seteril tentunya kontrol setelah 2-3 hari kalo ada perubahan berarti hasil kerja sobat sucess, untuk melihat berhasil dan tidaknya sobat bisa melihat explan yang di tanam akan menjalar berupa misellium berwarna putih.
Tunggu sampai misellium memenuhi botol/tabung reaksi, nah kalo udah full maka PDA siap di turunkan ke bagian sub kultur (F1)
Ok sekian dulu pembahasan kali ini mudah-mudahan bermanfaat salam blogger.....bye bye !
No comments:
Post a Comment